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怎么建穩轉株才能真的穩?
穩定轉染,即進入細胞的質粒整合入細胞基因組中,并能隨細胞分裂穩定傳遞下去。這是相對瞬時轉染而言的。瞬時轉染的表達時間短暫,外源基因導入整合基因組的幾率非常低,絕大部分以游離形式存在,不能隨細胞分裂而一同復制,導致最后拷貝數被稀釋,無法達到持【詳細】
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實驗室常用稱量儀器使用方法
1、臺秤臺秤用于精度不高的稱量,一般只能稱準到0.1g。稱量前,首先調節托盤下面的螺旋,讓指針在刻度板中心附近等距離擺動,此謂調零點。稱量時,左盤放稱量物,右盤放砝碼(10g或5g以下是通過移動游碼添加的),增減砝碼,使指針也在刻度板中心附近擺動。砝【詳細】
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PCR/RT-PCR還有不懂的?看這篇!
1.問題:RT-PCR靈敏度:在瓊脂糖凝膠分析中看到少量或沒有RT-PCR產物。可能原因:1)RNA被降解(如何確定RNA是否被講解,詳見前“植物RNA的提取”。建議解決方法:在用來驗證完整性之前先在變性膠上分析RNA使用良好的無污染技術分離RNA;在將組織從動物體取出【詳細】
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微生物分離和純化的基本原理操作
一、目的要求掌握倒平板的方法和幾種常用的分離純化物的基本操作技術。二、基本原理1.從混雜的微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物的分離與純化。本實驗采用平板分離法:該方法操作簡便,普遍用于微生物的分離與純化,其包括兩個方面【詳細】
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質粒純化方案中的關鍵步驟
如今質粒純化不再是什么難題,那么做了這么次質粒抽提的你了解質粒純化的原理嗎?你知道哪些步驟對質粒純化的成功起著關鍵作用嗎?QIAGEN質粒抽提簡單原理:在堿性條件下裂解細菌之后,將裂解液以zhi定的鹽濃度加入QIAGEN-tip當中。質粒DNA將發生選擇性的結合【詳細】
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載體的一些基礎知識以及如何閱讀質粒圖譜
載體主要有bin毒和非病毒兩大類,其中質粒DNA是一種新的非病毒轉基因載體。這里主要介紹下一個合格質粒的組成要素、載體的一些基本知識以及如何閱讀質粒圖譜。一、一個合格質粒的組成要素復制起始位點Ori即控制復制起始的位點。原核生物DNA分子中只有一個復制【詳細】
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古朵詳解:重組蛋白究竟是什么?
重組蛋白的產生是應用了重組DNA或重組RNA的技術從而獲得的蛋白質。體外重組蛋白的生產主要包括四大系統:原核蛋白表達,哺乳動物細胞蛋白表達,酵母蛋白表達及昆蟲細胞蛋白表達。重組蛋白獲得途徑:重組蛋白需要使用表達系統來對其進行制備,其獲得途徑可以分【詳細】
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菌種保藏中心如何進行細菌鑒定
傳統方法常規宏觀菌落形態學觀察,主要觀察菌落在其適合的培養基上的生長狀況:細菌在固體培養基上的生長形態、大小、顏色是否均勻一致,菌落個體表面及邊緣的生長狀況;在液體培養基上的渾濁狀況、沉淀狀況、液面菌膜狀況;半固體上穿刺接種后,觀察細菌是否沿著【詳細】
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支原體污染對細胞培養的危害!
1.支原體污染的普遍性支原體污染是細胞培養領域遇到的性問題,據文獻報道,綜合美國食品藥品監督管理局(FDA)、美國模式菌種收集中心(ATCC)等機構收到的相關數據,世界各國細胞系支原體污染的平均比例為30-60%。該數據未統計中國大陸的數據,但可以確定,大【詳細】
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幾種細胞凋亡檢測方法比較
細胞凋亡與壞死是兩種*不同的細胞凋亡形式,根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別,可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹幾種常用的測定方法。第一種細胞凋亡的形態學檢測根據凋亡細胞固有的形態特征,人們已經設計了許多【詳細】
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微生物細胞、植物細胞與動物細胞在培養上的區別
微生物細胞培養,簡稱微生物培養,包括原核細胞培養(細菌培養)和真核細胞培養(霉菌培養和酵母培養)。這些細胞小、且具有細胞壁,細胞周期非常短,如細菌每20-30min增殖1次。植物細胞培養指原生質體培養。未考慮分離出原生質體的植物細胞培養,無論是游離【詳細】
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植物DNA提取中的常見問題解答
提取植物DNA時遇到多糖成分的干擾,DNA質量一直不高,如何消除多糖的影響?參考見解:一般來說,SDS法提取的DNA會還有較多的多糖,使DNA成膠凍狀。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比較高,可用以下方法試一試:1、在DNA未溶出之前,【詳細】
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瓊脂糖凝膠電泳回收PCR產物
一.原理DNA--pian斷的分離與回收是基因工程操作中的一項重要技術,例如可收集特定酶切片斷用于克隆或制備探針,回收PCR產物用于再次鑒定等。回收實驗中兩個最重要的技術指標是純度和回收率:前者未達標時會嚴重影響以后的酶切、連接、標記等酶參與的反應;后【詳細】
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安全無小事,實驗室安全準則!
1)進入實驗室的學生必須接受安全教育,自覺服從管理,嚴格遵守實驗室的各項規章制度和規定,嚴格遵守儀器設備的操作規程。2)實驗前要認真閱讀教材,實驗參考書和有關參考資料,做好實驗預習報告,并按照任課教師的要求做好實驗前各項準備工作。部分實驗室需【詳細】
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科研人必看:實驗室固、液樣品取樣原則
在實驗過程中取用固體樣品和液體樣品是我們常做的事,所以掌握藥品及試劑的取用、稱量和溶解就是非常必要的。固體藥品的取用原則1.“三不”原則,即“不聞、不摸、不嘗”;具體說就是:不要去聞藥品的氣味,不能用手觸摸藥品,不能嘗試藥品的味道。2.節約原【詳細】
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關于生物安全柜一些小知識
一、如何區分不同級別的生物安全柜?生物安全柜是為操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時,用來保護操作者本人、實驗室環境以及實驗材料,使其避免暴露于上述操作過程中可能產生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。生物安全柜可分為Ⅰ【詳細】
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3種鑒定RNA質量好壞的方法
分子生物學實驗最大的特點就是好上手、難做好。進行DNA、RNA相關的實驗時,細節顯得尤為重要。今天,古朵生物介紹3種鑒定RNA質量好壞的方法。從源頭開始,把控實驗。1.為什么要確定RNA的質量與DNA不同,RNA是極為脆弱的,由于其單鏈結構,RNA的堿基和氫鍵全都【詳細】
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植物病原物的分離、培養與接種
一、目的和要求要求學會植物病原真菌、細菌、病毒和線蟲的分離、培養和接種的一般方法,并掌握其基本原理;學習植物傳染性病害研究中常用的接種方法,比較不同接種方法對病害發生發展過程與外界環境的差異。二、材料和用具新鮮的真菌和細菌病害材料(辣椒炭疽【詳細】
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雙十一提前購古朵試劑,科研人不容錯過!
2021年的雙十一購物狂歡盛典已經拉開序幕。科研事業的小伙伴們你們準備好了嗎?面對各路生物公司擺下的的PK擂臺,上海古朵生物有限公司在今年”雙十一”也送出*活動啦!生化試劑、染色液、培養基等各類科研試劑,驚喜絕dui超乎你的想象,只為讓你“賺”到,推出【詳細】
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病毒的超低溫保存方法
一、概述大多數微生物可用超低溫保存,超低溫保存法是適用范圍*的微生物保存法。需要復雜營養的微生物種,如用其他的貯存方法不能保持其活力(如植物的病原性真菌),通常可用超低溫的方法保存(ATCC1983;Halliday,Baker1985)。此法是將凍存在小管或安瓿里【詳細】
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