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掌握這些,一體化免疫熒光技術不用愁
免疫熒光技術(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞【詳細】
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蛋白質印跡法中為什么檢測不到目的蛋白?
很多小伙伴在對膠片印跡進行短暫曝光后,檢測不到目的蛋白??蓮囊韵聨讉€方面來優化實驗步驟:1、裂解物制備每道全細胞提取物的20–30?g總蛋白,通常足夠用來檢測。如果靶標蛋白的基礎水平,或蛋白質修飾程度低,可能需要通過化學刺激劑來誘導表達或修飾。你【詳細】
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數字PCR結果一定準確嗎?
數字PCR是繼實時熒光定量PCR之后新興的一種核酸絕對定量分析技能。經過將含有樣本的數字PCR反響液渙散到不計其數個獨立的微單元中,在PCR擴增后對每個微單元中的熒光信號進行判讀,計算出陰性和陽性的數量,蕞終利用泊松分布等統計學公式和軟件對結果進行計算【詳細】
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病毒轉染原理及步驟 古朵實驗√
在細胞相關的實驗操作中,對于一些按常規方法難以轉染甚至無法轉染的細胞,通過病毒介導的實驗能夠大大提高基因的轉導效率,以達到目的基因的高效瞬時表達。病毒轉染包括以下步驟:1構建載體2包裝提純病毒3感染靶細胞。以慢病毒為例。慢病毒(Lentivirus)載【詳細】
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蛋白質凝膠電泳凝膠的制備方法
【材料與試劑】(1)30%的丙烯-酰胺:分別稱取29g丙烯-酰胺,1gN,N-亞甲雙丙烯-酰胺加溫熱的去離子水60ml,加熱至37℃溶解,補加水至終體積為100ml,過濾,即配成30%(w/v)丙烯-酰胺貯存溶液。丙烯-酰胺和雙丙烯-酰胺在貯存過程中緩慢轉變為丙烯酸和雙丙烯酸【詳細】
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Western Blot 蛋白樣品制備
做WB之前,蛋白質的提取至關重要,成也提取敗也提取?,F在開講;一、單層貼壁細胞總蛋白的提取:1.倒掉培養液,并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養液(或將瓶直立放置一會兒使殘余培養液流到瓶底然后再用移液器將其吸走)。2.每瓶細胞加3ml4℃預冷的PBS(0.【詳細】
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為什么要對胎牛血清內毒素格外留意
養過細胞的童鞋大都有著這樣的共識:血清,由于其復雜的內在成分和難以控制的外界因素,它既是細胞生長的必-備營養,也是細胞死亡的致命“毒-藥”,古朵生物為您分析為什么要對胎牛血清內毒素格外留意。有下列情況者,對胎牛血清內毒素應格外留意篩選:1.養干【詳細】
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細胞凋亡與細胞焦亡到底怎么回事?
細胞凋亡和細胞焦亡的比較1、概念(1)細胞焦亡(Pyroptosis)細胞焦亡是一種炎癥程序性細胞死亡,由各種病理刺激引發,如中風、心臟病發作、癌癥、微生物感染等。其它已知類型的程序性細胞死亡包括凋亡和壞死。研究發現,細胞焦亡依賴于caspase-1,這從根本【詳細】
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蛋白質純度分析方法介紹
在評價樣品純度之前,首-先需要鑒定待測雜質的類型,如核酸、碳水化合物、脂質、無關蛋白質、同工酶類、失活蛋白質,進而確定在特定溶液條件中,能夠區分假定雜質和目標蛋白質的理化特性(化學分析或物理特征)。而純度則是指待測雜質含量低于某個特定水平。需【詳細】
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封閉血清的使用以及原理了解一下!
做免疫組化時,一般都會封閉。以減少假陽性。封閉主要是用于封去切片上一些非特異性吸附。用一種非特異性的蛋白,把那些容易吸附蛋白的空間和位點占起來,這樣,加上抗體時,抗體只能與對應的抗原去結合了。一般封閉可以用5%的BSA,這個價格便宜,而且效果還【詳細】
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胰蛋白胨與蛋白胨的區別
蛋白胨是一種外觀呈淡黃色的粉劑,具有肉香的特殊氣息。它作為微生物培養基的主要原料,在抗生素,醫藥工業,發酵工業,生化制品及微生物學科研等領域中的用量均很大;不同的生物體需要特定的氨基酸和多肽,因此存在各種蛋白胨,一般來說,用于蛋白胨生產的蛋【詳細】
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醫學微生物學實驗室規則
醫學微生物學實驗室是一個病原微生物高度集中的場所,其實驗對象大都是病原微生物,有傳染的危險。為了防止病原微生物感染自身、污染環境以及擴散傳播,要求同學們進入微生物學實驗室必須嚴格遵守以下規則:一、進入實驗室必須先穿本室的實驗服,必要的實驗指【詳細】
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科研人一定要了解的抗體保存方法!
抗體由于性質和所使用的儲存條件等各有不同,其保質期可能從幾周到幾年??贵w能否正確保存,直接決定了抗體的活性和使用效果。每個抗體有其*的保存蕞佳條件,但我們依然可以總結抗體保存的一般準則以及一些注意事項??贵w必須存放在適當的溫度和pH值范圍。為【詳細】
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蛋白質組和蛋白質組學分析
隨著人類基因組計劃研究成果的公布,人們對基因的認識逐漸清晰,但基因數量的有限性和基因結構的相對穩定性,與生命現象的復雜性和多樣性之間存在巨大反差。如何了解眾多的基因與危害人類身心健康的疾病之間的關系,對生命科學研究者來說仍是一項長期而艱巨的【詳細】
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常用細菌培養基制備及注意事項
實驗方法原理培養基是人工合成的一種混合營養料,用于分離培養細菌。常用的有基礎培養基、營養培養基、鑒別培養基、選擇培養基等。試劑、試劑盒牛肉/膏蛋白胨氯化鈉蒸餾水瓊脂NaOH酚紅指示劑儀器、耗材pH試紙三角燒瓶量筒天平吸管實驗步驟1.稱取牛肉/膏3g,蛋【詳細】
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凝膠過濾實驗注意事項
1.層析柱的選擇層析柱大小主要是根據樣品量的多少以及對分辨率的要求來進行選擇。一般來講,主要是層析柱的長度對分辨率影響較大,長的層析柱分辨率要比短的高;但層析柱長度不能過長,否則會引起柱子不均一、流速過慢等實驗上的一些困難。一般柱長度不超過10【詳細】
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蕞小抑菌濃度(MIC)及抑菌率的測定
提純蛋白質后,需要測定其最小抑菌濃度(MIC),有文獻提到根據MIC測得的結果計算抑菌率:抑菌率(%)=(陽性對照OD值—試驗OD值)/(陽性對照OD值—陰性對照OD值)X100樣品的MIC與同性質藥物和一些常用藥物的MIC進行比較才有意義,不能單純通過自己樣品的結果就【詳細】
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胎牛血清于細胞提供哪些益處?
眾所周知胎牛血清是現如今市面上培養細胞的有效物質,這是由于這種專-業的天然提取物中含有大量的營養,能夠有效地保證細胞的生長。胎牛血清是細胞培養中常用必-備的添加培養基。它營養豐富,大約含有三四百種不同成分,具有基礎培養基所不具備的營養因子。胎【詳細】
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如何辨別胎牛血清的質量?
胎牛血清是當前細胞培養用量蕞大的天然培養基,因其不可替代性胎牛血清的質量好壞關系到培養實驗的成敗與否。那么胎牛血清地位如此重要如何才能保障品質呢?1.內毒素內毒素含量越低的血清,胎牛血清級別就越高:內毒素≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;10E【詳細】
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微生物菌種功效解析!
各種菌種對作物的影響一、枯草芽孢桿菌:增加作物抗逆性、固氮。二、巨大芽孢桿菌:解磷(磷細菌),具有很好的降解土壤中有機磷的功效。三、膠凍樣芽孢桿菌:解鉀,釋放出可溶磷鉀元素及鈣、硫、鎂、鐵、鋅、鉬、錳等中微量元素。四、地衣芽孢桿菌:抗病、殺【詳細】
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