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n 對角線電泳技術圖解 n 對角線電泳或層析:1966年Brown及Hartlay提出用對角線電泳進行含-S-S-肽的定位,此方法是將水解后的肽混合物進行*相電泳,樣品點在中間,電泳畢,將樣品紙條剪下,置于裝有過甲酸的器皿中,用過甲酸蒸氣處理2小時,使-S-S-斷裂,此時含-S-S-肽段的靜電荷發生了改變。然后將紙條縫于另一張紙上,進行第二相電泳電泳,電泳條件與*相相同,只是與*次方向成直角。在第二相電泳中,那些不含-S-S-的髣民泳情況與*相相同,因此電泳后各肽斑均坐落在紙的對角線上,而那些含-S-S-的肽由于被氧化,電荷發生變化,第二相電泳速度就與*相不同,電泳結果這些肽斑就偏離對角線,肽斑可用茚三酮顯示。對角線法由于其速度快,操作簡便以及能用于小分子樣品,是直接分離-S-S-肽的好方法。 n 蛋白質一級結構的測定不斷有新方法和新思路出現,如X衍射法測定一級結構;分離相應蛋白質的mRNA,由mRNA的一級結構排出蛋白質的一級結構等。這些大膽的設想必將有助于蛋白質的一級結構測定,使人們掌握更多的工具和方法去探索生命的奧秘。 |