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n 水解酶也可運用二肽酶,兩組可用同一種酶水解如*套肽是A桞,C桪,E桭,G桯……第二套肽水解則先將該肽段N?端切去一個末位氨基酸,然后再開始二肽酶斷裂,結果是A,B桟,D桬,F桮……這樣分析比較也可排列出肽段順序。 n 二硫鍵定位 n 蛋白質分子不經任何處理,直接用酶水解,檢出其中二硫鍵的肽段,然后將二硫鍵拆開,分別測定兩個肽的順序,將此兩肽結構與測出的一級結構比較,就能找出相應的二硫鍵的位置。 n 含二硫鍵肽的檢出方法。 1)凝膠過濾或離子交換層析:用以分離各肽段,然后用特殊的二硫鍵顯色反應找出含二硫鍵的肽。 n 含-S-S-肽被分離后,即可進行肽段順序分析,并與已測定的該蛋白質的一級結構進行比較,即可找出相應的-S-S-位置,至此蛋白質的一級結構基本闡明。n 今后蛋白質一級結構的測定正朝自動化、快速化及微量化發展,關鍵問題仍然是進一步尋找蛋白裂解和肽分離的方法。 |