摘要：目的建立復(fù)方*劑中紅景天苷的含量測定方法。方法：采用Kromasil Cl8色譜柱（4.6mm×200mm，5μm），以水-乙腈-磷酸（V：V：V=93.0：7.O：0.2）為流動(dòng)相，流速為0.90mL/min；柱溫為40℃，檢測波長為223nm，進(jìn)樣15μL外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果紅景天苷在12～60mg/L內(nèi)峰面積與對(duì)照品的質(zhì)量濃度呈良好線性關(guān)系，其回歸方程為Y=12846ρ+7656，r=0.9998，平均回收率為96.7％，RSD為1.2％（n=6）。結(jié)論方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，為復(fù)方*劑的質(zhì)量控制提供一定依據(jù)。
    關(guān)鍵詞：復(fù)方*劑；紅景天苷；反相液相色譜法
    復(fù)方*劑由紅景天、沙棘等中藥組成，具有益氣養(yǎng)陰的功效。用于氣陰不足，淤血陽滯所引起的頭暈、頭痛、心悸、氣喘、乏力，缺氧引起的紅細(xì)胞增多癥。國內(nèi)外研究表明，紅景天具有抗缺氧、抗疲勞、抗輻射、抗衰老及增強(qiáng)腦力、體力機(jī)能等方面的特殊功效?。紅景天苷（salidroside）是紅景天的主要活性成分之一，作者通過RP-HPLC法測定復(fù)方*劑中紅景天苷的含量。方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量提供一定依據(jù)。
    1 儀器與試藥
    日本島津LC-10A液相色譜儀/：LC-10AT*、SPD-10A紫外可見檢測器/；DL-180超聲儀（浙江省向山縣石蒲海天電子儀器廠）。甲醇（色譜純，山東禹王實(shí)業(yè)有限公司禹城化工廠），乙腈（色譜純，山東禹王實(shí)業(yè)有限公司禹城化工廠），純凈水（杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司），其他試劑均為分析純。紅景天藥材由沈陽中藥飲片廠提供（出膏率為36.6％，紅景天苷含量0.429％），經(jīng)沈陽藥科大學(xué)藥用植物教研室鑒定，拉丁名為Rhodiolacrenulata。紅景天苷對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所），復(fù)方*劑（自制）。
    2 方法與結(jié)果
    2．1 色譜條件
    色譜柱：Kromasil C18柱（4.6 mm ×200mm，5μm）；流動(dòng)相：水．乙腈．磷酸（V：V：V=93.0：7.0：0.2）；流速：0.90Ml/min；檢測波長：223nm；柱溫：40℃；進(jìn)樣量：15μL。
    2．2 色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
    在“2．1”條色譜條件下，紅景天苷與其他峰可*分離，分離度為3.0，理論板數(shù)以紅景天苷計(jì)為3375。
    2．3 對(duì)照品與供試品溶液的配制
    對(duì)照品溶液的制備：取紅景天苷對(duì)照品約5.0mg,精密稱定，置25mL量瓶中，加甲醇溶解制成每mL約含0.2mg紅景天苷的溶液。供試品溶液的制備：取復(fù)方*劑10片，精密稱定，求得平均片重。將上述10片片劑研細(xì)，取片劑粉末約80mg，精密稱定，置10mL量瓶中，加甲醇，超聲15min溶解后，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，放置，取上清液經(jīng)微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液備用。
    陰性對(duì)照液的制備：按處方比例稱取紅景天外其他組分及輔料的粉末，按供試品溶液制備方法制備即得。
    2．4 陰性液干擾試驗(yàn)
精密吸取供試品溶液、陰性對(duì)照液和對(duì)照品溶液各15μL注入液相色譜儀中，由色譜圖可知，在與對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相應(yīng)的位置上，供試品溶液具有相同保留時(shí)間的色譜峰出現(xiàn)；而陰性液在此峰位無吸收，對(duì)本品中紅景天苷的測定無干擾。。
    2．5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制法操作，分別進(jìn)樣15μL，測得紅景天苷色譜峰面精密吸取上述對(duì)照品溶液0.6、1.2、1.8、
2.4、3.0mL，分別置于10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，各取15μL注入液相色譜儀中，按上述色譜條件測定色譜峰面積，以對(duì)照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為Y=12846ρ+ 7656，r=0.9998。結(jié)果表明，紅景天苷在12～60mg/L內(nèi)峰面積與對(duì)照品的質(zhì)量濃度呈良好線性關(guān)系。
    2．6 精密度試驗(yàn)
    精密吸取同一供試品溶液（第1批）15μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，測得紅景天苷色譜峰面積，RSD為0.26％。
    2．7 重現(xiàn)性試驗(yàn)
    精密稱取供試品6份（第1批），按“2．3”條方法操作，分別進(jìn)樣15μL，測得紅景天苷色譜峰面積，RSD為1.2％。
    2．8 穩(wěn)定性試驗(yàn)
    精密吸取同一供試品溶液（第1批）15μL，室溫放置，分別于0、2、4、8、12、24h按上述色譜條件進(jìn)樣，測定紅景天苷色譜峰面積，計(jì)算RSD為0.27％。結(jié)果表明，供試品溶液中紅景天苷在24h內(nèi)穩(wěn)定。
    2．9 回收率試驗(yàn)
    取已知含量的復(fù)方*劑樣品粉末約40.0mg，6份，精密稱定，加入一定量的紅景天苷對(duì)照品。按“2．3”條方法配制樣品，按“2．1”條色譜條件測定紅景天苷的含量，計(jì)算回收率。
    2．10 樣品測定
取樣品3批，按“2．3”條供試品溶液制備方法操作，以“2．1”條色譜條件測定，每批樣品測定3次取平均值，按外標(biāo)法計(jì)算每片中紅景天苷的含量。
    3 討論
    對(duì)于紅景天苷檢測波長的確定，多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道都集中在223nm和276nm，作者對(duì)紅景天苷的對(duì)照品溶液和陰性對(duì)照液在200～400nm內(nèi)進(jìn)行紫外掃描，認(rèn)為檢測波長為223nm較好。
    實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，流動(dòng)相中的磷酸含量對(duì)紅景天苷的保留時(shí)間影響較大。由于復(fù)方制劑中成份多而復(fù)雜，在紅景天苷主峰后仍有許多吸收峰，如在27.05、36.06、44.18、64.77、79.37、85.20min處各有一個(gè)明顯吸收峰，故供試品的色譜分析時(shí)間長達(dá)90min，因此，還需進(jìn)一步研究樣品的前處理工作，使分析方法更快捷。作者采用RP-HPLC法，測定復(fù)方*劑中紅景天苷的含量，方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，為該制劑的質(zhì)量控制提供理論依據(jù)。
參考文獻(xiàn)：
[1]徐寶軍，鄭毅男，李向高，等．紅景天屬植物研究新進(jìn)展[J]．中藥材，2000，23（9）：580—584．
[2]王曙，王鋒鵬．紅景天屬植物化學(xué)成分研究概述[J]．天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，1991，3（4）：58—65．
[3]劉玉珍，鄭健，王立健，等．反相液相色譜法測定復(fù)方紅景天心腦沖劑中紅景天苷的含量[J]．中國新
藥雜志，2000，9（3）：174—175．
[4]婁舜堯．HPLC法測定高山*中紅景天苷的含量[J]．中成藥，2001，23（12）：927-928．
[5]胡馨，張國明，童月建．*劑薄層鑒別及紅景天甙的含量測定[J]．中成藥，2000，22（11）：808-810．
[6]羅秀珍，鐘忠，謝忱，等．HPLC測定RGA膠囊中紅景天苷的含量[J]．中國中藥雜志，2002，27（3）：228-229．